Мониторинг химеризма
Трансплантация и мониторинг
За последние тридцать лет трансплантация костного мозга и гемопоэтических стволовых клеток стала широко распространенной медицинской процедурой в лечении ряда заболеваний во всем мире. Аллогенная трансплантация используется для лечения серповидноклеточной анемии, тяжелой апластической анемии, талассемии, острого лейкоза, хронического миелолейкоза и других заболеваний. После трансплантации очень важно знать, происходят ли новые кроветворные клетки от донора или от реципиента (получателя). На основе этого можно определить, насколько успешной была трансплантация, как быстро проходит и будет проходить замена кроветворных клеток реципиента клетками донора. Исследование происхождения кроветворных клеток после трансплантации называется анализом или мониторингом химеризма.
С 2006 года аллогенная трансплантация для пациентов с тяжелыми заболеваниями проводиться и в Латвии. Очень важно регулярно следить за соотношением между клетками реципиента и донора в организме реципиента — это позволяет оценить результаты трансплантации и вводить коррективы в дальнейшую терапию.
Что такое «химеризм»?
Химеризм может возникнуть по различным причинам: например, наследование от матери (перемещение стволовых клеток плода во время беременности (maternal-fetal stem cell trafficking during gestation)), совмещение кровеносных сосудов при беременности с двумя плодами (blood vessel sharing in fraternal twin gestation), переливание крови, трансплантация костного мозга, трансплантация пуповинной крови, трансплантация органов.
Изначально считалось, что после успешной трансплантации все кроветворные клетки развиваются из стволовых клеток донора. В последние годы было доказано, что после трансплантации кроветворные клетки донора и реципиента могут сосуществовать. Такое состояние называется смешанным химеризмом и может привести к преобладанию аутологических клеток (autologous recovery). Если после трансплантации все кроветворные клетки имеют донорское происхождение, речь идет о полном химеризме, и такого пациента называют полной химерой.
Описание анализа, справочные значения
Задача метода — определить степень и развитие химеризма в посттрансплантационный период. Метод базируется на анализе хромосомной ДНК, когда в образцах тканей реципиента и донора тестируются и сравниваются специфические генетические маркеры конкретных локусов, так называемые STR (от «short tandem repeats» - короткие тандемные повторы). В рамках одного локуса каждый индивид наследует две последовательности STR. В популяции STR встречается в разных локусах с разной частотой — поэтому чем больше анализируется локусов, тем больше можно получить информативных аллелей для анализа химеризма. При проведении теста на химеризм ключевую роль играет число анализируемых локусов, так как образцы донора и реципиента часто имеют родственное происхождение, что ограничивает количество информативных локусов. Мы тестируем по 15 локусам STR; этот метод позволяет выявить присутствие генома другого человека (донора) в крови даже на уровне 1%.
Процентное содержание донорских клеток в крови реципиента ниже 85% указывает на неудачную трансплантацию и сигнализирует о необходимости более тщательного наблюдения за пациентом.
Для анализа необходимы следующие образцы:
Образец венозной крови или слюны донора;
Образец венозной крови или слюны реципиента до трансплантации;
Образец венозной крови реципиента — после трансплантации и далее, с интервалами, предписанными врачом.